病理科免疫组化(IHC)面前已常规化开展,是仅次于常规HE的检测项目。IHC人员手工操作差异较大,如个人经验、状态、操作细节等影响很大,手工免疫组化标准化难,如样本组织大小、类型、抗体覆盖范围、抗体加样量等,手工优点是成本低,通量低。仪器自动化免疫组化能实现更有效的质控,样本号、抗体类型等可实现步骤追踪,利于问题排查。
IHC对照优先选取正常组织,如扁桃体可作为几十种抗体的对照。对照组织应用举例,如HER-2有1+、2+、3+、阴性的对照在同一张切片上。质控对照位置在同一玻片的上、下各一张,液态对照可上下各加一个阴阳对照。
(本文医院病理科庞钧译老师分享,仅供学习)
免疫组化对照制作分类:
1、组织内阳性对照
2、单个组织阳性对照
3、组织芯片阳性对照
4、多组织对照体系对照
5、多组织羊膜卷阳性对照
6、组织碎片悬液阳性对照:挑选出肿瘤丰富阳性组织蜡块2-3um连续切片张,放入50ml的干净烧杯中.用玻璃棒轻轻搅碎:加入40ml二甲苯混匀充分溶解.倒人50ml离心管,r/min离心3min,弃去二甲苯,再加人二甲苯重复过程2次:加人无水乙醇40ml.混匀再r/min离心3min.弃去无水乙醇.重复过程2次;最后在沉淀物中1:30—1:50加入75%乙醇,制成悬液,取3ul悬液滴在空白载玻片上,干燥后HE染色,镜下观察细胞的分布情况。如果细胞少,可以将悬浮液离心,吸去部分上清,如果镜下细胞重叠,可以适当加入75%乙醇。制作好的悬液标记好阳性对照的名称、制备的时间4℃或者一20℃保存备用,可以长期使用。
7、细胞系液态阳性对照
(详见推荐文献)
文献推荐:
[1].丁会珍,刘丹丹,金贻铎.免疫组织化学检测阳性对照的应用现状与进展[J].诊断病理学杂志,,27(7):-,.DOI:10./j.issn.-..07..
[2].DingW,HuangK,LüB,etal.Paraffin-embeddedTissueFragmentSuspension(PETFS):ANovelMethodforQualityControlPreparationinImmunohistochemistry.ApplImmunohistochemMolMorphol.;25(10):-.doi:10./PAI..
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